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미세조류 유래 고농축 DHA-rDG의 효소적 합성, Lipolysis 및 산화안정성 특성 연구

Enzymatic Synthesis and Characterization of DHA-Enriched Re-Esterified Diacylglycerol (r-DG) Derived from Microalgae: Lipolysis and Oxidative Stability

목차 도움말

Ⅰ. 서론 1
Chapter Ⅰ. Microalgae oil로부터 제조한 microalgae-fatty acid ethyl ester (FAEE)를 이용한 고농도 DHA 함유 rDG (DHA-rDG) 합성 9
Ⅱ. 재료 및 방법 9
1. 실험 재료 9
2. Microalgae oil로부터 알칼리 촉매 반응을 통한 FAEE 제조 10
3. SPD를 이용한 FAEE의 분리·정제 및 고농축 DHA-EE 원료 제조를 위한 분획 11
4. 고농축 DHA-EE로부터 rDG 합성 및 SPD 정제 12
1) DHA-EE로부터 고농축 DHA를 함유한 rDG 효소적 합성 12
2) SPD를 이용한 rDG oil 정제(DHA-rDG oil) 13
5. Fatty acid 및 acylglycerol composition 분석 14
1) Gas chromatography (GC)를 이용한 fatty acid composition 분석 14
2) Thin layer chromatography (TLC)를 이용한 FAEE 전환율 및 acylglycerol composition 분석 15
3) 자외선 검출기가 장착된 normal phase–high performance liquid chromatography (NP-HPLC)를 이용한 FAEE conversion rate (area%) 분석 16
4) 증발광산란검출기(ELSD)가 장착된 NP-HPLC를 이용한 acylglycerol composition (area%) 분석 17
5) 1H-NMR (1hydrogen-nuclear magnetic resonance)을 통한 acylglycerol composition 분석 18
6. 통계 분석 19
Ⅲ. 결과 및 고찰 20
1. Microalgae oil로부터 알칼리 촉매 반응으로 제조된 FAEE의 fatty acid composition 및 conversion rate 분석 20
2. SPD를 이용한 FAEE의 분리․정제 및 고농축 DHA-EE 분획 26
1) FAEE의 분리·정제 26
2) 분리·정제한 FAEE-D로부터 고농축 DHA-EE 분획 28
3. 고농축 DHA-EE로부터 rDG의 효소적 합성 및 SPD 정제 33
1) DHA-EE로부터 고농축 DHA를 함유한 rDG 효소적 합성 33
2) SPD를 이용한 고농축 DHA-rDG oil 정제 40
Chapter Ⅱ. 고농도 DHA 함유 rDG oil의 항산화제 종류에 따른 산화안정성 및 소화 특성 연구 46
Ⅱ. 재료 및 방법 46
1. 실험 재료 46
2. 항산화제 종류에 따른 DHA-rDG-A oil의 산화안정성 47
1) Oil의 peroxide value (POV) 측정 48
2) Oil의 p-anisidine value (p-AV) 측정 49
3) 1H-NMR 분석을 통한 total conjugated forms와 total aldehyde 함량 비교 50
4) GC 분석을 통한 fatty acid composition 비교 50
3. pH-Stat model을 이용한 oil의 in vitro digestion 측정 51
1) FFA 방출량 및 가수분해율(hydrolysis rate, %) 계산 52
4. 통계 분석 54
Ⅲ. 결과 및 고찰 55
1. 항산화제 종류에 따른 DHA-rDG-A oil의 산화안정성 비교 55
1) 단일 항산화제가 DHA-rDG-A oil의 산화안정성에 미치는 영향 56
2) 복합 항산화제가 DHA-rDG-A oil의 산화안정성에 미치는 영향 61
3) 저장 기간에 따른 항산화제 처리 DHA-rDG-A oil의 색 변화 64
4) 항산화제 종류에 따른 저장 중 DHA-rDG-A oil의 total conjugated forms 및 total aldehydes 변화 66
5) 항산화제 종류에 따른 저장 중 DHA-rDG-A oil의 fatty acid composition 변화 70
2. pH-Stat model을 이용한 DHA-rDG-A oil의 in vitro digestion 특성 비교 73
Chapter Ⅲ. 고농도 DHA 함유 rDG emulsion의 항산화제 종류에 따른 산화안정성 및 소화 특성 연구 80
Ⅱ. 재료 및 방법 80
1. 실험 재료 80
2. SPD를 이용한 고농축 DHA-rDG 정제(DHA-rDG-B oil) 81
1) HPLC-ELSD를 이용한 acylglycerol composition 분석 81
2) GC를 이용한 fatty acid composition 분석 81
3. 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion preparation 82
4. 항산화제 종류에 따른 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion의 산화안정성 83
1) 항산화제 처리 O/W emulsion 시료들의 물리적 안정성 84
2) 항산화제 처리 O/W emulsion 시료들의 POV 측정 85
3) 항산화제 처리 O/W emulsion 시료들에서 oil 추출 85
4) 항산화제 처리 O/W emulsion 시료들의 p-AV 측정 86
5) GC 분석을 통한 fatty acid composition 비교 86
5. pH-Stat model을 이용한 O/W emulsion의 in vitro digestion 측정 87
Ⅲ. 결과 및 고찰 88
1. SPD를 이용한 고농축 DHA-rDG-B oil 정제 88
2. 항산화제 종류에 따른 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion의 안정성 94
1) 항산화제 종류에 따른 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion의 물리적 안정성 94
2) 항산화제 종류에 따른 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion의 산화안정성 101
3) 항산화제 종류에 따른 저장 중 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion의 total conjugated forms 및 total aldehydes 변화 108
4) 10% DHA-rDG-B oil O/W emulsion에서 항산화제 종류에 따른 fatty acid composition 변화 112
3. pH-Stat model을 이용한 O/W emulsion의 in vitro digestion 특성 비교 116
Ⅳ. 결론 120
□ 참고문헌 123
□ Abstract 135

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