은시호의 아토피 피부염 개선효과
- 발행기관 강릉원주대학교 일반대학원
- 발행년도 2016
- 학위수여년월 2017. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 도움말 일반대학원 KIST강릉분원학.연협동과정
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/kangnung/000000009342
- 본문언어 한국어
초록/요약 도움말
아토피피부염은 심한 가려움증과 전체적인 피부건조를 동반하며, 병변이 특정부위에 반복하여 재발하는 만성 염증성 피부질환이다. 염증반응에 관여하는 췌장의 랑거한스 세포와 염증수지상 상피세포(inflammatory dendritic epidermal cell : IDECs)는 naive T 세포를 T helper2 type으로 전환시킴으로 알러지성 면역반응이 시작되며, 이 과정에서 인터루킨-4(Interleukin-4 : IL-4)가 매우 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 대나물의 뿌리인 은시호 추출물 및 분획을 이용하여 Rat basophilic leukemia(RBL)-2H3 세포에서 염증 조건 하에 IL-4의 발현을 감소시키는 것을 관찰하였다. 또한 HaCaT 세포에서 Tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), Interferon gamma (IFN-γ)와 Polyinosinic : polycytidylic acid (Poly I:C)로 유도된 염증에서 피부 염증 관련 유전자인 MDC, 피부장벽 분해효소 유전자인 Kallikrein-5(KLK-5), Kallikrein-14(K-14)를 확인한 결과 은시호 추출물 및 분획이 염증을 감소시키고, 피부장벽 기능을 향상시킨다는 것을 확인하였다. 세포실험을 통하여 증명된 기전을 바탕으로 아토피 동물모델에서 은시호 추출물 및 분획의 효능을 확인한 결과, 은시호 추출물 처리군에서는 피부의 발적, 염증관련 면역세포의 감소, 피부 두께 등이 감소하는 것이 관찰되었다. 또한 혈액에서 알러지를 유발하는 원인인 면역글로불린E (Immunoglobulin E ; IgE), 염증 면역반응을 일으키는 IL-4의 발현이 감소되는 것을 관찰하였다. 상기 결과를 종합하면, 은시호 추출물 및 분획이 아토피피부염의 증상을 개선시키는 유효 천연물 소재로 확인되어 추가적인 연구가 요구된다. 주요어 : 아토피피부염, 은시호, 인터루킨-4(Interleukin-4 : IL-4)
more초록/요약 도움말
Atopic dermatitis (AD) was known as a common chronic inflammatory skin disease by eczematous skin lesions and intense pruritus. Interleukin-4 (IL-4), a T-helper cell derived cytokine, is involved in immune responses of Atopic dermatitis. In this study, we observed that IL-4 expression was reduced in RBL-2H3 cells after Gypsophila oldhamiana extracts and its fractions treatment. Treatment of Gypsophila oldhamiana extracts and its fractions caused a significant reduction in the mRNA expression levels of MDC, KLK-5 and KLK-14. We further investigated the effect of Gypsophila oldhamiana extracts on DNCB, OXAZOLONE-induced atopic dermatitis-like skin lesions in Haireless and BALB/C mice. Immunoglobulin (Ig) E and cytokine (IL-4) serum level were suppressed by Gypsophila oldhamiana extracts In conclusion, we demonstrated that the Gypsophila oldhamiana extract and its fractions have potential functions as a therapeutic agent for AD patients. Keywords : Atopic dermatitis(AD), Gypsophila oldhamiana, Interleukin-4 (IL-4)
more목차 도움말
List of Figures ................................ ................................ ................................ .. Ⅰ
List of Tables ................................ ................................ ................................ .... Ⅱ
Abbreviations and Symbols ................................ ................................ .............. Ⅲ
국문요약 ................................ ................................ ................................ ............. Ⅳ
영문요약 ................................ ................................ ................................ ............. Ⅴ
1. 서 론 ................................ ................................ ................................ ................ 1
2. 재료 및 방법 ................................ ................................ ................................ .... 4
2.1 은시호의 추출 및 분획 ................................ ................................ .......... 4
2.2 은시호의 HPLC성분분석 ................................ ................................ ......... 6
2.3 In vitro에서의 은시호 추출물 및 분획의 아토피 효능 검증 .................. 8
2.3.1 세포배양 ................................ ................................ ........................... 8
2.3.2 세포독성 측정 ................................ ................................ .................. 8
2.3.3 RNA 분리 및 RT-PCR 분석 ................................ .......................... 9
2.3.4 SPINK5 발현 조절 효능 평가 ................................ ....................... 12
2.3.5 Tryptic enzyme과 Chymotryptic enzyme의 활성조절 효능평가 12
2.4 In vivo에서의 은시호 추출물 및 분획의 아토피 효능 검증 ............... 13
2.4.1 Oxazolone으로 유도한 mouse model에서 아토피 개선 효능검증 . 13
2.4.2 DNCB로 유도한 mouse model에서 아토피 개선 효능검증 .......... 15
2.4.3 단회 경구 독성 시험 ................................ ................................ ...... 17
2.4.4 안점막 자극 대체 시험 (HET-CAM assay) ................................ ... 17
3. 결과 ................................ ................................ ................................ ............... 18
3.1 은시호 추출물 및 분획이 세포의 생존율에 미치는 영향 ...................... 18
3.2 은시호 추출물 및 분획의 IL-4 mRNA 억제효과 ................................ .. 20
3.3 은시호 추출물 및 분획의 염증관련 유전자 발현에 미치는 영향 .......... 22
3.4 은시호 추출물 및 분획의 SPINK5 전사활성에 미치는 영향 ............... 24
3.5 은시호 추출물 및 분획의 피부장벽 관련 유전자 발현에 미치는 영향 . 26
3.6 은시호 추출물 및 분획의 enzymatic 활성 효과 ................................ ... 28
3.7 은시호 추출물의 단회 경구 독성시험 및 안점막 자극대체 시험 ........ 30
3.8 Oxazolone 아토피 모델에서 은시호 추출물 및 분획이 미치는 영향 . 32
3.9 DNCB 아토피 모델에서 은시호 추출물 및 분획이 미치는 영향 ......... 37
4. 결론 및 고찰 ................................ ................................ ................................ .. 43
5. 참고문헌 ................................ ................................ ................................ ........ 47
